Isolierung, Charakterisierung und Konzentrationsbestimmung eines Transportglobulins für Herzglykoside im Blut

• Antragsteller: Professor Dr. Wilhelm Schoner
• Fachliche Zuordnung: Agrar-, Forstwissenschaften und Tiermedizin
• Förderung: Förderung von 1995 bis 2003
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 5238022

Ziel des Projektes ist es, die Struktur des Bindungsproteins und seine physiologische Funktion zu verstehen. Das Protein soll daher in größeren Mengen isoliert werden, weitere Aminosäuresequenzen nach Markierung mit SH- und Lysin-spezifischen Sonden und mit dem proteinreaktiven Digoxigeninderivat HDMA gewonnen werden. Mittels der Aminosäure-Sequenzdaten wollen wir über abgeleitete Primer versuchen, die spezifische mRNA mittels PCR zu amplifizieren, in einen Vektor zu ligieren und die Basensequenz des Inserts zu bestimmen. Falls dieser Weg nicht erfolgreich ist, wollen wir mittels der vorhandenen Antikörper eine 2-Phagen-Gewebebank screenen und daraus das Gen isolieren. Es soll ein ELISA für das Bindungsprotein aufgebaut werden, um die Proteinkonzentration des Bindungsproteins im Blut und seine möglichen Änderungen in Herzglykosid-sensitiven und unsensitiven Spezies (Ratte) unter verschiedenen Kreislaufbedingungen zu messen. Immunhistochemisch sollen die das Protein synthetisierenden Zellen detektiert werden.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen