Durchflusszytometer mit bis zu fünf Lasern, Spektralanalyse und Autosampling

• Fachliche Zuordnung: Mikrobiologie, Virologie und Immunologie
• Förderung: Förderung in 2022
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 504371625

Unsere Studien versuchen zu verstehen, wie die räumliche Organisation und Dynamik von Plasmamembran-Signalwegen die Aktivierung und Funktion von T-Zellen steuern. Die Forschung basiert auf unseren Erkenntnissen, dass Plasmamembranproteine in nanometer großen Domänen lokalisiert sind. Unsere Studien zeigten, dass die T-Zell-Aktivierung dynamisch durch die räumlichen Beziehungen verschiedener Nanodomänen, die Bildung von Signalkomplexen in ihnen und die Translokation von Signalmolekülen zwischen ihnen gesteuert wird. Wir untersuchen die zugrunde liegenden molekularen Mechanismen mit multidisziplinären Strategien die Einzelmolekülmikroskopie mit biochemischen, biophysikalischen und zellbiologischen Ansätzen kombinieren. Insbesondere interessieren wir uns für die Signalwege des T-Zell-Rezeptors (TCR) und des inhibitorischen Program Cell Death Protein (PD-1) während der T-Zell-Aktivierung und Anti-Tumor-Reaktionen. Unser ultimatives Ziel ist es, neue Kontrollprinzipien in T-Zell-Signalwegen zu identifizieren und sie zu nutzen, um T-Zell-Antworten für zukünftige Immuntherapien zu modifizieren.Wir beantragen ein Durchflusszytometer mit Spektralanalysator und Autosampler das für unser neu eingerichtetes Labor an der Albert-Ludwigs-Universität Freiburg und zur Verwirklichung unserer aktuellen und zukünftigen Forschungsziele unerlässlich ist. Das angeforderte Durchflusszytometer ist für mehrere Zwecke unerlässlich:(i) Untersuchung der Immunzelldiversität während Immunantworten und in Tumoren.(ii) Analysen der T-Zellentwicklung, Differenzierung und Aktivitätszustände.(iii) Qualitätskontrolle von primären und genetisch modifizierten Zellen, um die Erfolgsraten und Datenproduktion unserer Studien zu maximieren, speziell von in-vivo-Anti-tumorreaktionen und Einzelmolekülmikroskopie.(iv) Charakterisierung und Testen neuer Sonden und Liganden für die Durchflusszytometrie und Fluoreszenzmikroskopie.(v) Screening von Bibliotheken kleiner Moleküle, z.B. mit FRET-Sonden.Das Durchflusszytometer hat die folgenden zwei Hauptfunktionen:(i) Fünf Laserlinien (einschließlich UV) zum Nachweis von bis zu 64 Fluorophoren durch Spektralanalysen.(ii) Ein 96-Wellplate-Sampler für Experimente mit mittlerem Durchsatz von Zell- und Gewebeproben sowie von Bibliotheken mit niedermolekularen Inhibitoren.

• DFG-Verfahren: Forschungsgroßgeräte
• Großgeräte: Durchflusszytometer mit bis zu fünf Lasern, Spektralanalyse und Autosampling
• Gerätegruppe: 3500 Zellzähl- und Klassiergeräte (außer Blutanalyse), Koloniezähler
• Antragstellende Institution: Albert-Ludwigs-Universität Freiburg
• Leiter: Professor Björn Lillemeier, Ph.D.