Durchflusszytometer (5-Lasersystem)

• Fachliche Zuordnung: Neurowissenschaften
• Förderung: Förderung in 2019
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 424726578

Eine zentrale Methode der immunologischen und auch neuroimmunologischen Forschung ist die Analysen von Zellpopulationen mittels Durchflusszytometrie. Zum gegenwärtigen Stand der Forschung ist es essentiell, Multiparameter-Analysen von verschiedensten Zellpopulationen mit Hilfe moderner und leistungsstarker Durchflusszytometer durchzuführen. Diese ermöglichen die gleichzeitige Analyse von Zellpopulationen mit vielen verschiedenen Fluoreszenzmarkern, Farbstoffen und Reportergenen. Gerade im Feld der Neuroimmunologie wird es immer wichtiger, die verschiedenen ZNS-ständigen und -assoziierten Zellpopulationen mittels Durchflusszytometrie zu analysieren. In verschiedenen Studien konnte gezeigt werden, dass Immunzellpopulationen im ZNS eine deutliche Heterogenität zeigen und in Homöostase sowie neuroimmunologischen und –degenerativen Erkrankungen eine enorme Komplexität, Dynamik und Plastizität entwickeln. Selbst für einfache Analysen bedarf es daher oft schon einer großen Anzahl an Markern, um die verschiedenen Zellpopulationen eindeutig identifizieren zu können. Ein modernes Durchflusszytometer mit fünf Lasern ermöglicht eine deutlich höhere Flexibilität in der Auswahl an fluoreszenzmarkierten Antikörpern, Farbstoffen und Fluoreszenzproteinen, da mehr Anregungswellenlängen zur Verfügung stehen. Dadurch kann ein breiteres Spektrum an Parametern gleichzeitig gemessen werden und verschiedene Marker können über alle fünf Anregungswellenlängen verteilt werden, wodurch es zu weniger Spill-over-Effekten zwischen einzelnen Kanälen kommt. Gerade die Anregung der am meisten verwendeten Marker-Kombinationen und Fluoreszenzproteine können mit dem 5-Laser Durchflusszytometer auf zwei Laserlinien getrennt angeregt werden, was zu einer deutlich besseren Auftrennung und klareren Signalen führt. Die Reduktion dieser Spill-over-Effekte erlaubt deutlich sensitivere Analysen, die weiterhin durch anpassbare Laserintensitäten verbessert werden können. Für die ansässigen Arbeitsgruppen im Institut ist bisher nur ein 3-Laser-Durchflusszytometer vorhanden, mit dem Analysen von bis zu zehn Parametern möglich sind. Den Anforderungen der neuen Forschungsprojekte und der Komplexität der Fragestellungen entsprechend, wird aber dringend ein modernes Durchflusszytometer für die Analyse von 20 Parametern benötigt, um auch in Zukunft wegweisende Forschungsarbeiten im Bereich der Neuroimmunologie und Immunologie durchführen zu können. Aufgrund der dargelegten Anforderungen beantragen wir hiermit ein Durchflusszytometer mit 5 Lasern als Großgerät.

• DFG-Verfahren: Forschungsgroßgeräte
• Großgeräte: Durchflussyztometer (5-Lasersystem)
• Gerätegruppe: 3500 Zellzähl- und Klassiergeräte (außer Blutanalyse), Koloniezähler
• Antragstellende Institution: Albert-Ludwigs-Universität Freiburg
• Leiter: Professor Dr. Marco Prinz