Modulares STED-Mikroskop inklusive Zweiphotonen-Anregung

• Subject Area: Basic Research in Biology and Medicine
• Term: Funded in 2019
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 411346541

Das STED-Mikroskop ist für die präzise ortsaufgelöste Lokalisierung und Funktionsuntersuchungen von Membranrezeptoren (GPCR und Ionenkanäle) in lebenden Zellen und Gewebe im SFB "High-end microscopy elucidates membrane receptor function – ReceptorLight – Jena/Würzburg" vorgesehen. STED ist komplementär zu den langsamen SIM und dSTORM Methoden im SFB und erlaubt den gleichzeitigen Nachweis molekularer Wechselwirkungen über Förster Resonanz Energie Transfer (FRET). STED wird hier mit FLIM und Anisotropie-Messungen kombiniert und auf fluoreszierende Proteine (FP) als spezifische Marker in lebenden Zellen und Gewebe optimiert. Die modulare Konfiguration erlaubt STED-Methodenentwicklungen, um Photoschädigungen bei Langzeituntersuchungen zu minimieren. Optimierung der erreichbaren Ortsauflösung unterhalb der Beugungslimits mittels ISM-STED und MED-STED ist insbesondere für FPs essentiell. STED-FCS wird für die Verkleinerung des konfokalen Volumens für mikromolare Ligandenkonzentrationen benötigt. Variable Laseranregung ist für neue Fluoreszenzmarker an Agonisten der Rezeptoren notwendig, und Zweiphotonen-Anregung für Gewebemessungen als auch für maximalen Anisotropie-Kontrast bei homoFRET. Ein solches STED-Mikroskop ist weder in Jena noch an anderen Orten (national und international) zugänglich.

• DFG Programme: Major Research Instrumentation
• Major Instrumentation: Modulares STED-Mikroskop inklusive Zweiphotonen-Anregung
• Instrumentation Group: 5090 Spezialmikroskope
• Applicant Institution: Universitätsklinikum Jena
• Leader: Professor Dr. Michael Börsch