Rekonstitution der enzymatischen Biosynthese des antimikrobiellen Peptides Microcin J25

• Antragsteller: Professor Dr. Mohamed A. Marahiel
• Fachliche Zuordnung: Biochemie
• Förderung: Förderung von 2006 bis 2010
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 34978984

Im Vordergrund des Vorhabens stehen biochemische und molekularbiologische Untersuchungen zur Identifikation und Charakterisierung der Enzyme, die am Reifungsprozess des ribosomal synthetisierten makrozyklischen Peptids Microcin J25 (MccJ25) beteiligt sind. Obwohl die Strukturen zahlreicher Microcine und ihre breit angelegten antimikrobiellen Eigenschaften gut untersucht sind, ist über ihre Biosynthese und ihre extensiven posttranslationalen Modifikationen sehr wenig bekannt. Mit diesem Antrag möchten wir mit Microcin J25 als Modellsystem die beteiligten Enzyme McjA, McjB, McjC und McjD rekombinant herstellen und ihre Funktion bei der Prozessierung, Zyklisierung und Freisetzung des ribosomal synthetisierten Vorläuferpeptids McjA (58 Aminosäurereste) untersuchen. Insbesondere soll hierbei der Mechanismus der Spaltung von McjA zwischen Lysin 36 und Glycin 37, die Seitenkettenaktivierung von Glutamat 45 und der Mechanismus des Ringschlusses zwischen Glycin 37 und Glutamat 45 auf molekularer Ebene geklärt werden.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen