Analyse der generationenübergreifenden Effekte des Piwi/piRNA Mechanismus im Zebrafish.
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Um die grundlegenden Funktionen von piRNAs in Wirbeltieren zu analysieren wurde ein einzigartiges piRNA / Zielgen-System in-vivo etabliert. Zu diesem Zweck wurden transgene Zebrafischlinien erzeugt, die unterschiedliche piRNAs von EGFP-modifizierten TEs sowie eine exogene Zielsequenz, das keimzellspezifische vasa:egfp Transkript, exprimieren. Die piRNA-Maschinerie des Zebrafisches ähnelt der für Drosophila und Maus beschriebenen. Mit Hilfe dieses in vivo-Systems haben wir (1) die piRNA-Synthese von definierten genomischen Loci, (2) die Art und Weise, wie die piRNA-Reaktion auf kürzlich aufgetretene Transposons initiiert wird und (3) die möglichen Funktionen verschiedener Komponenten des Piwi-Signalwegs bei der langfristigen Ausschaltung von Zielgenen präliminär untersucht. Diese Arbeit wird das Wissen über TE-Silencing und den Schutz der genomischen Integrität bei Wirbeltierspezies in Zukunft wesentlich erweitern.
