Nutzung primordialer Keimzellen des Huhns zur Etablierung von Tiermodellen für Studien auf dem Gebiet der Entwicklungsbiologie und Infektionsmedizin

• Antragsteller: Professor Dr. Benjamin Schusser
• Fachliche Zuordnung: Tiermedizin
• Förderung: Förderung von 2011 bis 2013
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 208203050

Das Huhn ist ein exzellentes Tiermodell zur Untersuchung von Fragen zur Entwicklungsbiologie, Physiologie und Immunologie. Nicht zuletzt aus diesem Grund wurde das Hühnergenom als erstes Haustiergenom sequenziert und damit die Suche nach Kandidatengenen erheblich erleichtert. Dennoch ist es bis heute aufgrund des Fehlens geeigneter Transgentechnologien im Huhn nur schwer möglich diese hinsichtlich ihrer Funktion zu untersuchen. Die kürzlich etablierte Technik zur Gewinnung primordialer Keimzellen (PGC) bietet nun eine große Chance um Hühner gezielt genetisch zu manipulieren. Im Rahmen dieses Projektes werden zunächst PGCs aus Embryonen der ingezüchteten Hühnerlinie 0 gewonnen. Aufgrund des hohen Inzuchtgrads ist die Transplantation von Gewebe zwischen Tieren dieser Linie ohne die Gefahr von Abstoßungsreaktionen möglich. In PGCs der Linie 0 wird die DNA für ein grün fluoreszierendes Protein integriert. Die gewonnenen, grün fluoreszierenden PGCs werden in Hühnerembryonen injiziert, um keimbahntransgene Tiere zu erzeugen. Durch zweimaliges Anpaaren dieser Tiere entstehen vollständig grün fluoreszierende Hühner. Die fluoreszierenden Zellen dieser Tiere können nun auf Tiere der gleichen Hühnerlinie transplantiert werden, um deren Verhalten im Tier zu untersuchen.Das zweite Ziel des Projektes ist es ein knockout Huhn für die Erforschung der B-Zell-Biologie im Huhn zu generieren. Unter Verwendung von geeigneten Vektoren werden die Gene für die leichte und die schwere Kette des B-Zell-Rezeptors in Linie 0 PGCs deletiert. Knockout Hühner, welche aus diesen PGCs hervorgehen, werden nicht in der Lage sein einen funktionsfähigen B-Zell-Rezeptor zu exprimieren, sie sind daher frei von B-Zellen. In Kombination bieten diese beiden Hühnerlinien bisher einmalige Möglichkeiten zur Analyse der B-Zellbiologie durch adoptiven Transfer und die Verfolgung von Zellen im intakten Organismus. Dieses Projekt wird zudem erstmals die Etablierung eines Gen knockouts beim Huhn beschreiben.

• DFG-Verfahren: Forschungsstipendien
• Internationaler Bezug: USA
• Gastgeber: Professor Kirk C. Klasing