Echtzeit-Konfokal-Mikroskop mit integriertem Patch clamp-Messstand
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Das Gerät wird/wurde verwendet: - zur Darstellung GFP-exprimierender Neurone in organotypischen Schnittkulturen des Hippocampus von Mäusen. Die Dynamik von synaptischen spines wurde somit visualisiert. - zur Untersuchung der Lokalisation und der Exozytose BDNF-GFP-enthaltender Vesikel in transfizierten Neuronen organotypischer Schnittkulturen des Hippocampus. - um in akuten Hirnschnitten von BDNF-GFP-knock-in Mäusen, bei denen das GFP-markierte BDNF unter der Kontrolle des endogenen BDNF-Promotors exprimiert wird, die Lokalisation und die Freisetzung von BDNF-GFP-enthaltenden sekretorischen Granula zu untersuchen. - zur Durchführung immuncytochemischer 3-Fach-Färbungen organotypischer Kulturen des Hippocampus. Die Mehrfachfärbungen erfolgten zur Charakterisierung der Amyloid-ß und BDNF-abhängigen Proliferation und Differenzierung neuronaler Stammzellen. - zur Untersuchung der subzellulären Lokalisation und eines möglichen Kotransportes von APP und BDNF- GFP-enthaltender Vesikel in transfizierten dissoziierten hippokampalen Neuronen. - zur Untersuchung der subzellulären Lokalisation von CAPS1 und anderen Regulatoren der Exozytose von Transmitter-Vesikeln und neurosekretorischen Granula. Dabei kamen immuncytochemische Mehrfach-Färbungen von dissoziierten Kulturen hippocampaler Neurone nach Transfektion mit BDNF-GFP-Plasmiden zur Anwendung.
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
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(2010) Essential cooperation of N-cadherin and neuroligin-1 in the transsynaptic control of vesicle accumulation. Proc Natl Acad Sci USA 107:11116-11121
Stan A, Pielarski KN, Brigadski T, Wittenmayer N, Fedorchenko O, Gohla A, Lessmann V, Dresbach T, Gottmann K
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(2013) Embryonic stem cells stably expressing BDNF-GFP exhibit a BDNF release-dependent enhancement of neuronal differentiation. J Cell Sci 126(Pt 21):5062-73
Leschik J, Eckenstaler R, Nieweg K, Lichtenecker P, Brigadski T, Gottmann K, Lessmann V, and Lutz B
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(2013) Single-cell juxtacellular transfection and recording technique. Pflugers Arch. 465(11):1637-49
Daniel J, Polder H R, Lessmann V, Brigadski T
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(2014) Pre- and postsynaptic twists in BDNF secretion and action in synaptic plasticity. Neuropharmacology. 76 Pt C:610-27
Edelmann E, Lessmann V, Brigadski T
