Untersuchungen zum Crosstalk von NF-kB und Stat3 bei der Regulation Apoptose-relevanter Gene im Multiplen Myelom und Prostatakarzinom
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Im Rahmen dieses DFG-Projektes sollte die Kooperation der onkologisch relevanten Transkriptionsfaktoren Stat3 und NF-κB untersucht werden. Dazu wurden spezifische siRNA gegen Stat3, p50, p52, p65 und RelB hergestellt und ihre Funktionalität getestet. In der Prostatakarzinomlinie DU145 wurden die siRNAs einzeln und in Kombination mit Stat3 eingesetzt und die nach 30h gewonnene RNA auf dem Gene Array 1.0 von Affymetrix analysiert. Unter den durch Stat3 und NF-κB regulierten Genen befand sich die OncomiR-21. Mit Hilfe von 2D-DIGE und einer statistischen Auswertung von Genexpressionsdaten wurden neue putative Zielgene von miR-21 identifiziert. Darunter befanden sich die Tumorsuppressoren ANP32A und SMARCA4. Ihre Regulation durch miR-21 wurde im Western Blot bestätigt. Durch Reportergenanalysen konnten die miR-21-Bindungsstellen in den 3’-UTR’s beider mRNAs identifiziert und beide Gene somit als direkte miR-21-Ziele beschrieben werden. Anschließende physiologische Untersuchungen zeigten, dass ANP32A die proliferativen, antiapoptotischen und migrationsfördernden Effekte von miR-21 zum Teil vermitteln kann.
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
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MicroRNA-21 targets tumor suppressor genes ANP32A and SMARCA4. Oncogene 2011, 30 (26): 2975-85
Schramedei K, Mörbt N, Pfeifer G, Läuter J, Rosolowski M, Tomm JM, von Bergen M, Horn F, Brocke-Heidrich K
