Molecular therapy of liver failure by siRNA mediated inhibition of proapoptotic mediators and transduction of anti-apoptotic fusion proteins
Final Report Abstract
Das akute Leberversagen durch Virusinfektionen weist eine sehr hohe Sterblichkeit bei Patienten auf. Um die Prognose der Patienten zukünftig zu verbessern, hatte das Projekt die Ziele die molekularen Mechanismen des viral induzierten akuten Leberversagens zu identifizieren und die Erkenntnisse über diese molekularen Mechanismen für eine zielgerichtete Therapie des akuten Leberversagens zu nutzen. Mit Hilfe eines Mausmodells der akuten adenoviralen Hepatitis identifizierten wir unterschiedliche wichfige molekulare Mechanismen, die an der Entwicklung des akuten Leberversagens beteiligt sind. Vor allem Mediatoren des Rezeptorvermittelten Zelltodes wurden dabei als interessante Zielstrukturen für eine zukünftige molekulare Therapie erkannt. Durch die Hemmung einer zentralen Schaltstelle des Rezeptor-vermittelten Zelltodes gelang es uns, die Sterblichkeit des akuten Leberversagens nach adenoviraler Infektion bei Mäusen signifikant zu senken. Unsere Ergebnisse zeigten darüber hinaus zum ersten Mal (zeitgleich und unabhängig mit Song et al.) eine erfolgreiche therapeutische Anwendung der RNA Interferenz (RNAi) im Säugetier. In einem zweiten molekularen Therapieansatz versuchten wir durch künstliche Proteine herzustellen, die nach Passage in die Leberzellen den Zelltod unterdrücken sollten. Diese Technik der sogenannten „Proteintransduktion" wurde sowohl in Zellkultur als auch im Mausmodell untersucht. Leider waren die unterschiedlichen Fusionsproteine (aus Proteintransduktionsdomänen mit den antiapoptofischen Mediatoren) in allen unseren Experimenten wenig erfolgsversprechend. Der Grund für diesen Misserfolg liegt wahrscheinlich an der geringen Effektivität der Proteintransduktion. Unsere Ergebnisse zeigen, dass man zum Schutz der Leberzellen nach einer viralen Infektion größere Mengen zelltodhemmenden Mediatoren in den infizierten Zellen benötigt, die zwar durch eine siRNA- Transduktion nicht aber durch eine Proteintransduktion gewährleistet werden.
Publications
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