Charakterisierung des Hepatitis C Virus-Replikationskomplexes in lebenden Zellen
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Während der Postdoc-Zeit des Antragstellers gelang es ein live cell imaging-System zu etablieren, mit dem wir die Dynamik und die Mechanismen der HCV-Replikationskomplex-Bildung in lebenden Zellen untersuchen werden kann. Hier konnten wir zwei unterschiedliche Ausprägungen des HCV-Replikationskomplexes identifizieren. Neben großen, perinukleären Membranous Web-Strukturen finden sich eine Vielzahl von punktförmigen HCV-Replikationskomplexen < 0.45 μm, die ihrerseits zwei Bewegungsmuster unterschiedlicher Ätiologie aufweisen: zum einen folgen sie der starken Eigenbewegung des ER, zum anderen findet sich ein mikrotubulärer Transport über lange Distanzen, der unabhängig vom ER erfolgen kann. Diese scheint jedoch nicht dem sekretorischen Pathway zum ERGIC und Golgi zu folgen. Die Bewegung der Membranous Webs ist dagegen sehr gering und reflektiert ebenfalls die lokale Eigenbewegung des ER. Neben der Analyse des HCV-Replikationskomplexes in lebenden Zellen, konnten wir außerdem an der Entwicklung des infektiösen HCVcc-Systems sowie der Entdeckung von Claudin-1 als Rezeptor für die HCV- Infektion beitragen. In zukünftigen Arbeiten möchten wir die viralen und zellulären Faktoren, welche zur Web-Formation und zum beobachteten schnellen saltatorischen Transport der kleinen HCV-Replikationskomplexe beitragen weitergehend identifizieren und charakterisieren. Gerade das HCVcc-System stellt dabei eine interessante Möglichkeit dar, auch die Dynamik des HCV-Replikationskomplexes an frühen Zeitpunkten der Infektion zu analysieren.
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
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A dynamic view of hepatitis C virus replication complexes. 11th International Meeting on Hepatitis C Virus and Related Viruses, Heidelberg, Germany, 2004
Wölk B, Büchele B, Blum HE, Moradpour D, Rice CM
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A dynamic view of hepatitis C virus replication complexes. 55th Annual Meeting of the American Association for the Study of Liver Diseases, Boston, MA, USA, 2004. J Hepatol 2004;40 (Suppl 1):60A
Wölk B, Büchele B, Blum HE, Rice CM, Moradpour D
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Complete replication of hepatitis C virus in cell culture. Science 2005;309:623-626
Lindenbach BD, Evans MJ, Syder AJ, Wölk B, Tellinghuisen TL, Liu CC, Maruyama T, et al.
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Claudin-1 is a hepatitis C virus co-receptor required for a late step in entry. Nature, 2007;446:801-5
Evans MJ, von Hahn T, Tscherne DM, Syder AJ, Panis M, Wölk B, Hatziioannou T, McKeating JA, Bieniasz PD, Rice CM
