Mechanismen der endothelialen Nuclear Factor Kappa B (NFkB)-Hemmung durch NO

• Applicant: Privatdozent Dr. Martin Spiecker
• Subject Area: Gastroenterology
• Term: from 2001 to 2005
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5330974

NO hemmt in vaskulären Endothelzellen den proinflammatorischen Transkriptionsfaktor Nuclear Factor kappa B (NF-kB). Basierend auf neueren Erkenntnissen zur NF-kB Aktivierungskaskade sollen mögliche Interkationen von NO mit verschiedenen NF-kB-Aktivierungsschritten untersucht werden: Die Interaktion der Transkriptionskoaktivatoren `cAMP responsive element binding protein (CREB)-binding protein´ (CBP) und p300 mit der NF-kB-Untereinheit RelA und der Einfluss von NO auf transkriptionelle Repressorproteine, die bei der Regulation NF-kB abhängiger Gene eine Rolle spielen. Die Analyse dieser Fragestellungen soll mit folgenden Techniken in Endothelzellen erfolgen: Western Blot, Koimmunpräzipitation, Immunfluoreszenz, Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA), Protein-Überexpression, Herstellung von Reportergenkonstrukturen für transiente und in vitro Phosphorylierung. Die Aufklärung zusätzlicher NF-kB hemmender Mechanismen von NO soll nicht nur dem Verständnis intrazellulärer Funktionen von NO dienen, sondern auch Basis für die Entwicklung gezielter entzündungshemmender Therapieansätze sein. Der NO-Wirkungsmechanismus erscheint vielversprechend, da NO im Gegensatz zu den meisten bekannten NF-kB-Hemmern initial eine nukleäre Translokation des Transkriptionsfaktors erlaubt, was für die notwendige antiapoptotische Wirkung von NF-kB nach TNF-alpha-Einwirkung Voraussetzung ist.

• DFG Programme: Research Grants