Function of pro-sequences in oxidative folding of cystin-knot-proteins

• Applicant: Professorin Dr. Elisabeth Schwarz
• Subject Area: Biochemistry
• Term: from 2000 to 2007
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5281894

Der oxidative Faltungsweg von zwei Vertretern der Cystinknoten-Struktursuperfamilie, humanem NGF (Nerve Growth Factor) und BMP-2 (Bone Morphogenetic Protein 2) soll untersucht werden. Proteine dieser Strukturfamilie besitzen ein charakteristisches Disulfidmuster: Zwei Disulfidbrücken bilden einen Ring, durch welchen eine dritte Disulfidbrücke hindurchtritt. Die uns bekannten Mitglieder der Cystinknoten-Familie werden als Prä-Pro-Proteine synthetisiert. Während die Prä-Sequenz die Translokation in das endoplasmatische Retikulum vermittelt, ist die Rolle der Pro-Sequenz im molekularen Detail ungeklärt. Wir konnten zeigen, daß pro-NGF wesentlich schneller und mit höheren Ausbeuten als NGF zur nativen Struktur faltet. Ziel unserer Untersuchungen ist es, die Rolle des Pro-Peptids bei der Strukturbildung der beiden Wachstumsfaktoren zu verstehen. Im Rahmen dieser Untersuchungen sollen disulfidverbrückte Faltungsintermediate während der oxidativen Faltung der reifen und der Pro-Formen analysiert werden. Es soll geklärt werden, ob eine 'in trans'-Faltung durch das isolierte Pro-Peptid erfolgen kann. In weiterführenden Experimenten soll durch biophysikalische Analysen Aufschluß über strukturelle Eigenschaften der Pro-Formen und der isolierten Pro-Peptide erhalten werden. In Zusammenarbeiten soll die biologische Aktivität der Pro-Formen analysiert werden.

• DFG Programme: Research Grants