Characterization of sequential steps in the import of the adenoviral genome into the nucleus of somatic cells

• Applicant: Professor Dr. Harald Wodrich
• Subject Area: Virology
• Term: from 2000 to 2003
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5273600

Im Rahmen des hier beantragten Projektes ist geplant, einzelne Aspekte des adenoviralen Kernimportes näher zu untersuchen. Zum einen soll überprüft werden, ob das Vorhandensein eines nukleären Lokalisationssignals (NLS) auf dem Hexon-Protein von Adenoviren zum Kerntransport und zur Bindung des Nukleokapsids an die Kernpore führt. Kompetitionsexperimente und Mutagenese- Experimente sollen zur weiteren Charakterisierung der VirusDeterminanten für den Transport zum Kern und bei der Kernporenbindung eingesetzt werden. Desweiteren ist geplant, die Funktion des adenoviralen Proteins VII beim Kernimport zu charakterisieren, welches das adenovirale Genom in regelmäßigen Abständen besetzt und zusammen mit der DNA in den Zellen importiert wird. Hierzu sollen Mutagenese- und Kompetitionsexperimente ein (vermutetes) nukleäres Lokalisationssignal identifizieren und die am Kernimport beteiligten zellulären Transportrezeptoren charakterisiert werden. Weiterhin ist geplant, Faktoren zu idetifizieren, welche am Uncoating des adenoviralen Nukleocapsids an der Kernpore beteiligt sind und damit zur Freisetzung des viralen Genoms führen. Dieses soll durch Fraktionierung von Zytosol erfolgen, wobei insbesondere die Rolle von Hitzeschockproteinen untersucht werden soll. Die geplanten Untersuchungen basieren zum Teil auf einem etablierten in vitro Kernimport-Assay für Adenoviren aus dem Labor von Prof. Gerace (Saphire et al. 2000) und sollen für das beantragte Projekt adaptiert werden.

• DFG Programme: Research Fellowships
• International Connection: USA