Charakterisierung der Pharmakon- und Nukleotidbindung an den Sulfonylharnstoffrezeptor

• Applicant: Professor Dr. Ulrich Quast
• Subject Area: Anatomy and Physiology
• Term: from 1996 to 2003
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5264412

In diesem Projekt sollen die Pharmakon-Bindungsstellen des SUR genauer untersucht und deren Wechselwirkung mit den Nukleotidbindungsstellen des SUR aufgeklärt werden. Dazu soll die Lokalisation der Bindungsstelle des neuen Radioliganden 3H-PKF217-774, eines Strukturanalogons des Öffners Cromakalim, auf dem SUR bestimmt werden. Weiterhin soll der Zusammenhang zwischen der Besetzung der Glibenclamid-Bindungsstelle durch bestimmte Nicht-Sulfonylharnstoffe und der Schließung des Kanals geklärt werden. Ein wichtiger weiterer Punkt ist die Messung der Änderung der Nukleotidbindung und der wahrscheinlichen Hydrolyse am SUR2B durch Kanalöffner und -Schließer mit fluorimetrischen Methoden. Dazu soll der SUR in einem baculoviralen Expressionssystem exprimiert und, falls nötig, mit Hilfe eines His-Tags gereinigt werden. Schließlich soll die Kopplung des SUR2B/Kir6.1-Kanals an das Zytoskelett mit Hilfe von green-flurorescent-protein-Fusionsproteinen untersucht werden. Die Untersuchungen sollen zur Aufklärung des Wirkungsmechanismus der Kanalmodulatoren und der Signaltransduktion im Kanal beitragen und Hinweise zur Synthese spezifischerer Kanalmodulatoren geben.

• DFG Programme: Priority Programmes
• Subproject of: SPP 1003: Struktur und Funktion ATP-sensitiver und einwärtsgleichrichtender Kaliumkanäle