Supramolecular dynamics of gap junctions

• Applicant: Professor Dr. Dieter F. Hülser
• Subject Area: Biophysics
• Term: from 1999 to 2002
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5233242

Unter dem Elektronenmikroskop werden Gap Junction Kanäle in Plasmamembranen von Säugerzellen meist auf Grund ihrer Aggregation zu quasi-kristallinen Plaques identifiziert. Wie wir zeigen konnten, erlaubt eine Mehrfachmarkierung mit Antikörpern jedoch eine feinere Unterscheidung. Mit Hilfe der indirekten Immunogoldmarkierung der Replicas von Gefrierbrüchen gelingt die Identifizierung ubiquitylierter und nicht-ubiquitylierter Plaques sowie dispers verteilter Gap Junction Kanäle. Mit dem beantragen Projekt wollen wir die Dynamik der Protein-Zusammensetzung dieser Strukturen ermitteln und herausfinden, welche aktive kommunikationskompetente Kanäle enthalten und welche Sammelstellen für abzubauende Membranproteine sind. Dazu werden wir durch Hemmung des Ein- und Abbaus von Membranproteinen diese in frühen und späten Stadien ihres Lebenszyklus anreichern und mit parallel dazu durchgeführten Messungen des CalceinTransfers prüfen, welche dieser Strukturen bestimmten Aktivitätszuständen der Gap Junction Kanäle zuzuordnen sind.

• DFG Programme: Research Grants