Homologe und illegitime DNA-Rekombination in Pflanzen

• Applicant: Professor Dr. Holger Puchta
• Subject Area: Plant Biochemistry and Biophysics
• Term: from 1995 to 2004
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 5220940

In unseren bisherigen Arbeiten konnten wir die Mechaninsmen der homologen Doppelstrangbruchreparatur (DSBR) in Tabak aufklären und die DSB-induzierte Rekombination zwischen ektopischen Sequenzen erreichen. Erstmals konnte gezeigt werden, daß es bei der DSBR mittels illegitimer Rekombination im Tabak neben Deletionen auch zu Insertionen von genomischen und transgenen Sequenzen kommt. Aufbauend auf dem etablierten System soll nun ermittelt werden, ob sich Pflanzen mit unterschiedlicher Genomgröße (Vergleich Tabak-Arabidopsis) in ihrem Reparaturverhalten (Verhältnis Insertionen/Deletionen) unterscheiden. Weiterhin soll geklärt werden, wie häufig DSBs mit Hilfe allelischer Sequenzen auf dem homologen Chromosom repariert werden können. Durch kontrollierte Expression des Restriktionsenzyms I-SceI soll getestet werden, ob homologe Rekombination in Höheren Pflanzen spezifisch während der Meiose bzw. der halpoiden generativen Phase induziert werden kann. Nach der Etablierung weiterer Assaysysteme in der Modellpflanze Arabidopsis soll damit begonnen werden, die Rolle von Faktoren, die an der DSB Reparatur beteiligt sind, zu charakterisieren.

• DFG Programme: Research Grants