Entwicklung bispezifischer Einzelketten-Antikörper (scFv) zur Anreicherung endothelialer Progenitorzellen (EPC) am atherosklerotischen Gefäßendothel.
Final Report Abstract
Ziel des Forschungsprojektes war die Entwicklung bispezifischer Einzelketten-Antikörper (scFv) zur Anreicherung im Blutstrom zirkulierender endothelialer Progenitorzellen (EPC) am atherosklerotischen Gefäßendothel. Zur Herstellung der bispezifischen scFv wurden die cDNA für jeweils zwei unterschiedliche scFv im Tandemformat hintereinander fusioniert. Anschließend wurde das Protein in einem Insektenzellkultursystem exprimiert und für die funktionelle Testung aufgereinigt. Es konnten erfolgreich bispezifische scFv entwickelt werden, die eine stabile Adhäsion von Maus-EPCs an aktivierte Thrombozyten (GP llb/llla) sowie aktivierte Endothelzellen (VCAM-1) ermöglichen. Als Zielmolekül auf den Maus-EPCs wurde hierbei das Stammzell-Antigen-1 (Sca1) venwendet. Für humane EPCs wurde ein bispezifischer scFv entwickelt, der über das Oberflächenantigen CD34 human EPCs an aktivierte Thrombozyten (GP llb/llla) adhärieren ließ. Die in vitro Testung konnte erfolgreich abgeschlossen werden. Für die in vivo Testung wurde ein Intravitalmikroskopie Modell etabliert, das die Echtzeitbeobachtung der Adhäsion GFP-positiver Maus-EPCs am Gefäßendothel erlaubt. Die in vivo Testung dauert derzeit an, hat aber bereits die erwarteten positiven Teil-Ergebnisse erbracht. Nach Abschluss der Testungen sollen die bispezifischen scFv als neue Therapeutika für die Behandlung atherosklerotischer Erkrankungen weiterentwickelt werden. Eine Kommerzialisierung der neu entwickelten bispezifischen scFv in Zusammenarbeit mit der forschenden Pharmazeutischen Industrie Entwicklung wird angestrebt mit dem Ziel der weiteren klinischen Entwicklung dieser bispezifischen scFv.
Publications
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