Herkunft und Funktion von membranständigen Glucocorticoidrezeptoren humaner Immunzellen
Zusammenfassung der Projektergebnisse
Die in Teil A dieser Arbeit durchgeführten Experimente, die zur Klärung der Herkunft des mGCR dienen sollen, ließen nicht auf ein bestimmtes Exon schließen, welches für das Vorhandensein des mGCR verantwortlich ist. Gründe dafür können in dem durch die Methode an sich limitierten Zeitrahmen liegen, da der Abbau des mGCR auch verzögert stattfinden kann oder aber ein sehr schneller Knockdown mit anschließender Neusynthese des mGCR sichtbare Effekte nach 72h ausschließt. Da es sich bei dieser Methode um eine transiente Transfektion handelt, soll zukünftig - um dauerhafte Effekte nachzuweisen - eine stabile GCR-Knockdown Zelllinie mit Hilfe von shRNA hergestellt und die Zellen auf Effekte (vor allem auf mGCR-Ebene) überprüft werden. Es konnte durch Teil B der Arbeit gezeigt werden, dass der mGCR funktionell aktiv ist. Nicht verwunderlich dabei ist sein Einfluss auf die Signaltransduktion, was sowohl im PepChipTM als auch im Microarray sichtbar ist. Beide Ergebnisse müssen abschließend verifiziert werden. Es ist geplant mittels phosphoBioplex die durch Dexa-BSA regulierten Kinasen weiter einzugrenzen und die dadurch beeinflusste Signalkaskade zu identifizieren. Besonders stark regulierte Gene, die im Microarray identifiziert wurden, sollen letztendlich mittels PCR bestätigt werden.
Projektbezogene Publikationen (Auswahl)
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Analyse der Herkunft und Funktion membrangebundener Glucocorticoidrezeptoren, Vortragreihe des DRFZ/ Charite
Stahn C
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Molecular mechanisms of glucocorticoid action and selective glucocorticoid receptor agonists. Mol Cell Endocrinol. 2007 Sep 15;275(l-2):7l-8. Epub 2007 Jun 2. Review
Stahn C, Löwenberg M, Hommes DW, Buttgereit F
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Genomic and nongenomic effects of glucocorticoids. Nat Clin Pract Rheumatol. 2008 Oct;4(10):525-33. Epub 2008 Sep 2. Review
Stahn C. Buttgereit F.
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Novel insights into mechanisms of glucocorticoid action and the development of new glucocorticoid receptor ligands. Steroids. 2008 Oct;73(9-10): 1025-9. Epub 2007 Dec 14. Review
Löwenberg M, Stahn C, Hommes DW, Buttgereit F
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CD4 T cells under pathophysiological hypoxia: Dexamethasone impairs hypoxia inducible factor (HIF)-l alpha via suppression of macrophage migration inhibitory factor (MIF). Ann Rheum Dis 2009;68(Suppl3):370
T. Gaber, K.B. Erekul, M. Fangradt, K. Tykwinska, M. Hahne, P. Maschmeyer, M. Wagegg, S. Schellmann, C. Stahn, M. Jakstadt, P. Kolar, R. Dziurla, G. Burmester, F. Buttgereit
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Transfection with exon specific GCR-siRNA alters gene and protein expression of the cytosolic glucocorticoid receptor in HeLa cells 3 x 3 Abstract Präsentation I. 37. Kongress der Deutschen Gesellschaft für Rheumatologie (DGRh)
C. Stahn. S. Schellmann, M. Jakstadt, T. Gaber, M. Hahne, M. Fangradt, M. Wagegg, P. Kolar, G.-R. Burmester, F. Buttgereit
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Transfection with exon specific GCR-siRNA alters gene and protein expression of the cytosolic glucocorticoid receptor in HeLa cells. Ann Rheum Dis 2009;68(Suppl3):175
C. Stahn, S. Schellmann, M. Jakstadt, G. Burmester, F. Buttgereit
