4-color ALEX single molecular FRET setup

• Subject Area: Physical Chemistry
• Term: Funded in 2015
• Project identifier: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Project number 274318864

Die Arbeitsgruppe Hugel untersucht seit fast 10 Jahren die Wechselwirkung von einzelnen (Bio)Polymeren mit Oberflächen sowie die Funktion von molekularen Maschinen. In den letzten Jahren konnten wir wesentliche Beiträge zur nukleotidabhängigen zeitaufgelösten Konformation einzelnen Proteine leisten. Mit 2 und 3 Farben Einzelmolekül-FRET Messungen konnten wir für das Hitzeschockprotein Hsp90 zeigen, wie Konformationsänderungen, Nukleotidbindung und ATP-Hydrolyse zusammenhängen. Der nächste große und wesentliche Schritt ist nun zu verstehen, wie molekulare Maschinen (z.B. Hsp90) ihre Substrate prozessieren. Dazu ist es notwendig sowohl den Zustand der molekularen Maschine als auch des Substrats zeitaufgelöst zu bestimmen. Hierfür ist ein 4 Farben Einzelmolekül-FRET Aufbau in total interner Reflexionsgeometrie mit alternierender Laseranregung (ALEX) notwendig, wie im Forschungskonzept näher erläutert. Solch ein Gerät ist kommerziell nicht verfügbar und existiert weltweit wenn überhaupt sicher nur wenige Male als Eigenbau (meines Wissens noch nicht in Deutschland). Deshalb beantragen wir hiermit die Komponenten für ein solches System.

• DFG Programme: Major Research Instrumentation
• Major Instrumentation: 4-color ALEX single molecular FRET setup
• Instrumentation Group: 5230 Densitometer, Mikrophotometer, Fluoreszenz-, Lumineszenz-Imagingsysteme
• Applicant Institution: Albert-Ludwigs-Universität Freiburg
• Leader: Professor Dr. Thorsten Hugel