Die Rolle von PKD2 für die HSP90-, Hypoxie-, und TGF beta-vermittelte Epithelial-Mesenchymalen Transition und die Metastasierung

• Antragsteller: Dr. Ninel Azoitei
• Fachliche Zuordnung: Hämatologie, Onkologie
• Förderung: Förderung von 2013 bis 2019
• Projektkennung: Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG) - Projektnummer 232091324

The vorliegende Antrag plant die Rolle der Protein Kinase D2 bei der Epithelial-Mesenchymalen-Transition (EMT) zu untersuchen. EMT spielt eine wesentliche Rolle für die Tumormetastasierung und wird durch verschiedene Faktoren wie z.B. Hypoxie, verschiedene Transkriptionsfaktoren sowie Wachstumsfaktoren reguliert. Die Untersuchungen stellen damit eine Fortsetzung unserer Arbeiten des noch laufenden Antrags dar, wobei verschiedene state-of-the-art Zellmodelle zur Untersuchung von EMT eingesetzt werden sollen. Dazu sollen genaue morphologische Charakterisierungen der Tumorzellen, die auf verschiedenen Matrizes und/oder 3D-kultiviert werden, mit verschiedenen biochemischen und immunohistochemischen Analysen kombiniert werden. Die in vitro Analysen sollen zusätzlich im murinen subkutanen Xenograft- sowie dem CAM-Modell durch die Analysen von EMT Markerproteinen in vivo komplementiert werden. Im Weiteren soll das Metastasierungspotential im Mausmodelle nach intravenöser Tumorzellinjektion unter dem Einfluss von PKD2 in vivo untersucht werden. Die genannten Analysen zur Assoziation von PKD2 und EMT werden unser Wissen über die Notwendigkeit von Proteinkinasen auf die Tumorgenese maßgeblich erweitern. Im Detail wird der Antrag die Assoziation von PKD2 und EMT im Kontext des TGF-beta Signalwegs sowie des Chaperons HSP90 und von Hypoxie untersuchen. Diese Assoziation soll eine zentrale Rolle im vorliegenden Folgeantrag einnehmen, wobei insbesondere geklärt werden soll, ob die Regulation von EMT durch PKD2 auf ähnlichen Signalwegen basiert wie PKD2 Angiogenese reguliert, oder ob andere bereits bekannte EMT-regulierende Signalwege aktiviert werden. Durch den Einsatz fokussierter Genset- sowie Massspektometrieanalysen versuchen wir unter Hypoxiebedingungen an EMT-durchführenden Tumorzellen neue Interaktionspartner sowie PKD2-regulierte Signalwege in zu identifizieren. Abschließend sollen HSP90 Inhibitoren, die sich derzeit in der klinischen Entwicklung befinden, verwendet werden um durch die Destabilisierung von PKD2 insbesondere in hypoxischen Tumoren, die im vorliegenden Antrag gewonnenen Erkenntnisse in Hinblick das therapeutische Potential zu untersuchen zu evaluieren.

• DFG-Verfahren: Sachbeihilfen