Zellsorter
Final Report Abstract
Der 5-Laser Zellsorter wurde in verschiedenen Projekten und Kooperationen verwendet, welche hier kurz zusammengefasst werden. Extra-adrenale Glucocorticoid-Synthese in Darm, Lunge und Haut: Glucocorticoide sind wichtige immunregulatorische Hormone, welche vor allem in der Nebenniere produziert werden. Arbeiten aus unserer eigenen Arbeitsgruppe sowie anderen Laboratorien zeigen jedoch auf, dass auch andere Gewebe Glucocorticoide produzieren können und somit zur Regulation der lokalen Immunhomeostase beitragen. Unsere Arbeitsgruppe untersuchte dabei vor allem die Regulation und Rolle von lokalen Glucocorticoiden in Damr, Lunge und Haut. Der Zellsorter wurde in diesen Projekten vor allem zur Isolation von Leukozytenpopulationen aus diesen Organen verwendet um deren Funktionen oder Genexpressionsprofile zu studieren. Zudem wurde das Gerät verwendet um Zellen in bestimmten Zellzyklusstadien aufzureinigen. Ebenso kam die Reinigung von mit fluoreszierenden Proteinen transfizierten Zellen zur Anwendung. Synergistischer Zelltod durch TRAIL und Chemotherapie: In diesem Projekt untersuchten wir wie das TNF- Familienmitglied TRAIL in Synergie mit chemotherapeutischen Substanzen Apoptose induziert in hepatozellulären Tumorzellen. Dabei konnten wir herausfinden, dass TRAIL über einen Jun-Kinase abhängigen Mechanismus den mitochondrialen Bcl-2 abhängigen Apoptoseweg verstärkt. Der Zellsorter wurde dabei vor allem zur Aufreinigung/Anreicherung von mit Fluoreszenzproteinen transfizierten Zellen verwendet. Die Rolle von LRH-1 in T Zellen: In diesem Projekt haben wir die Rolle des nukleären Rezeptors und Transkriptionsfaktors LRH-1 in T Lymphozyten untersucht. Diese Studie konnte zum ersten mal aufzeigen, dass LRH-1 in der T Zelllinie exprimiert ist und dort eine wichtige Rolle spielt in der T Zellentwicklung durch die Regulation der T Zellproliferation. Dabei haben gefunden, dass eine Deletion von LRH-1 in T Zellen zu einer starken Reduktion der Anzahl von peripheren T Zellen führt und zu einer Unfähigkeit auf Immunstimulation zu reagieren. Das Gerät wurde in dieser Studie extensiv zur quantitativen und qualitativen Aufreinigung von Immunzell-Subsets verwendet für weitergehende funktionelle Studien sowie Genexpressionsprofile.
Publications
- Ex vivo culture of intestinal crypt organoids as a model system for assessing cell death induction in intestinal epithelial cells and enteropathy. Cell Death Dis. 2014 May 15;5:e1228
Grabinger T. et al.
(See online at https://doi.org/10.1038/cddis.2014.183) - Thiazolide promote apoptosis in colorectal tumor cells via MAP kinase-induced Bim and Puma activation. Cell Death Dis. 2015 Jun 4;6:e1778. 2015
Brockmann A. et al.
(See online at https://doi.org/10.1038/cddis.2015.137)
