Kapillarsequenzierer
Plant Sciences
Final Report Abstract
Das Gerät wird gemeinsam von verschiedenen Abteilungen des Büsgen-Instituts, Fakultät für Forstwissenschaften und Waldökologie und der Abteilung Pflanzenzüchtung des Departments für Nutzpflanzenwissenschaften (DNPW), Fakultät für Agrarwissenschaften, beide an der Georg-August-Universität Göttingen, genutzt. An der Abteilung für Forstgenetik und Forstpflanzenzüchtung des Büsgen-Instituts wurde das Gerät in Assoziationsstudien von phänotypischen Merkmalen mit den daran beteiligten Kandidatengenen eingesetzt. Mit Hilfe von vergleichenden Sequenzierungen wurden SNPs (single nucleotide polymorphisms) in Kandidatengenen analysiert, die bei Buche (Fagus sylvatica L.) an der Trockenstressantwort und der Blühphänologie und bei Kiefer (Pinus sylvestris L.) an der Stressantwort auf radioaktive Strahlung beteiligt sind. Die SNP Analyse für große Probenanzahlen (populationsgenetische Untersuchungen) wurden bei Eiche („Sequencing of IDH genes in Quercus spp“) und Buche mit Hilfe von SNaPshot-Analysen („primer extension“) durchgeführt. Weiterhin wurden in maritimer Kiefer (Pinus pinaster) ausgehend von cDNA Sequenzen verschiedene Kandidatengene auf genomischer Ebene identifiziert und Intron- und Exonbereiche bestimmt. Die Sequenzanalyse bestimmter Chloroplasten-Regionen wird für phylogenetische Untersuchungen in Shorea und zur Entwicklung eines molekularen Schlüssels zur Identifizierung von Shorea Arten (DNA barcoding) genutzt. Darüber hinaus wurden für Cebil (Anadenanthera colubrina) und Hainbuche (Carpinus betulus) kern-kodierte Mikrosatellitenmarker (SSRs: simple sequence repeats) etabliert und das jeweilige Wiederholungsmotiv der Marker durch Sequenzierung bestimmt. An der Abteilung für Forstbotanik und Baumphysiologie des Büsgen-Instituts wird das Gerät für die Sequenzierung von ITS-Sequenzen zahlreicher Mycorrhizapilze in Biodiversitätsprojekten genutzt. Des Weiteren wird es zur Genotypisierung von Buchenwurzeln eingesetzt. An der Abteilung Molekulare Holzbiotechnologie und technische Mykologie des Bu sgen-Instituts wird das Gerät zur Identifizierung von bekannten und unbekannten holzbewohnenden Pilzen aus temperaten Wäldern Australiens, sowie aus Holzwerkstoffen und anderen Holzprodukten durch Internal Transcribed spacer (ITS) Sequenzierung genutzt. Dies dient dem Aufbau einer ITS-Datenbank für diese Pilze. An der Abteilung Pflanzenzüchtung des DNPW wird das Gerät hauptsächlich für die Mikrosatelliten- und AFLP-Analyse genutzt. Die Marker dienen zum einen der Bestimmung genetischer Distanzen in Projekten zur Erweiterung der genetischen Diversität von Raps über Resynthesen aus B. rapa und Wildformen von B. oleracea. Zum anderen werden die Marker für die Erstellung genetischer Karten verwendet, die zur Kartierung von QTL für Öl- und Phytosterolgehalt im Samen von Winterraps genutzt werden. Darüber hinaus werden die Karten auch zur Identifizierung von Genomregionen mit gestörten Spaltungen in von Mikrosporen abgeleiteten spaltenden Populationen verwendet, um Gene zu lokalisieren, die bei der Herstellung von doppelhaploiden Linien beim Raps eine Rolle spielen. In geringerem Umfang wird das Gerät auch zur Sequenzierung genutzt. So dient die Sequenzierung von fad2-Genen (Ölsäuredesaturasen) beim Winterraps der Identifizierung neuer Mutanten in diesen Genen und über die Sequenzierung der BBM1 und BBM2 Gene im Winterraps und seinen Ausgangsarten sollen lokusspezifischer PCR-Primer zur Kartierung der Gene entwickelt werden.
Publications
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